利用显性负模型研究整合素β3胞浆段RGT序列对信号转导的调控机制

• 作者: 吕媛靖 周玉兰 奚晓东 崔雄鹰 阮铮 陶岚岚 黄建松
• 来源期刊: 中国细胞生物学学报
• 关键词: 显性负 整合素αⅡbβ3 竞争酶联免疫测定 蛋白质相互作用 信号转导
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 135-145
• 页数: 11页
• 语种: 中文

摘要

该研究探讨整合素β3胞浆段RGT序列在整合素信号转导中的作用.利用IL-2R胞外段和跨膜段(Tac)与整合素β3胞浆段全长或截短序列构建Tac-β3嵌合体,即Tac-β3和Tac-β3△759,使其分别在表达GPⅠbⅨ、整合素αⅡbβ3的CHO细胞株(ⅠbⅨ/ⅡbⅢa-CHO细胞株)中稳定表达(即ⅠbⅨ/ⅡbⅢa-CHO/Tac-β3、ⅠbⅨ/ⅡbⅢa-CHO/Tac-β3△759细胞株).利用竞争酶联免疫法对Tac-β3嵌合体进行定量,观察ⅠbⅨ/ⅡbⅢa-CHO/Tac-β3、ⅠbⅨ/ⅡbⅢa-CHO/Tac-β3△759细胞株在固相化纤维蛋白原上的伸展情况(代表外向内的信号转导)；Co-IP研究Tac-β3嵌合体、β3与下游信号分子Src的结合情况.结果发现:竞争酶联免疫法证实了两个细胞株的Tac-β3嵌合体表达都高于野生型β3,保证了Tac-β3嵌合体对内源性β3在结合胞内分子中的显性负效应；ⅠbⅨ/ⅡbⅢa-CHO/Tac-β3细胞株在固相化纤维蛋白原上的黏附伸展能力受到抑制,而ⅠbⅨ/ⅡbⅢa-CHO/Tac-β3△759细胞株在固相化纤维蛋白原上的黏附伸展能力并未受到明显影响.Co-IP结果显示:Tac-β3能结合内源性Src,而胞浆段RGT序列缺失的Tac-β3△759则不与内源性Src结合.选择性地破坏Tac-β3的Src结合能力即足以去除其对外向内信号转导的显性负效应,从而表明:整合素β3尾端RGT序列与Src的相互作用在这一信号转导通路中起决定性的作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	奚晓东		16	29	3.0	4.0
2	陶岚岚		2	0	0.0	0.0
3	黄建松		7	22	4.0	4.0
4	吕媛靖		1	0	0.0	0.0
5	周玉兰		3	0	0.0	0.0
6	崔雄鹰		5	4	1.0	2.0
7	阮铮		2	0	0.0	0.0