枯草芽孢杆菌XF1菌株中XFsacA基因的克隆及功能验证

• 作者: 何月秋 吴毅歆 毛自朝 王志远 贾凡 赵静
• 来源期刊: 华南农业大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 枯草芽孢杆菌XF1 蔗糖 代谢 基因克隆
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 植物保护
• 页码范围: 154-158
• 分类号: Q78
• 字数: 4776字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-411X.2012.02.007

摘要

枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis XF1是从土壤中分离的一株利用蔗糖快、能高效防治根肿病的专利菌株.为探明其高效的蔗糖代谢机制,用PCR从该菌中扩增到蔗糖代谢关键基因蔗糖-6-磷酸水解酶基因(XFsacA基因),其编码的蛋白质氨基酸序列与枯草芽孢杆菌B168菌株中的XFsacA基因有97％的相似性,且发生了12个氨基酸突变.将该基因中约1.4 kb的编码框序列连接到表达载体pQE30上,构建了重组表达质粒pQE30-XFsacA,该质粒转入到不能利用蔗糖的Escherichia coli BL21中,后者能在以蔗糖为唯一碳源的M9无机离子培养基中正常生长,并表达出了一条约54 000蛋白条带.结果预示XFsacA基因氨基酸序列的替代可能是XF1高效利用蔗糖的基础,同时XFsacA基因的克隆与其在E coli中的表达研究,为利用蔗糖发酵的工程E.coli构建奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	贾凡	云南农业大学农学与生物技术学院	1	3	1.0	1.0
2	毛自朝	云南农业大学农学与生物技术学院	63	424	12.0	16.0
3	王志远	云南农业大学农业生物多样性应用技术国家工程中心	3	14	2.0	3.0
4	赵静	云南农业大学农业生物多样性应用技术国家工程中心	1	3	1.0	1.0
5	吴毅歆	云南农业大学农学与生物技术学院	84	513	13.0	18.0