一种简单的哺乳动物细胞附着体质粒CaCl2转化方法

• 作者: 李照熙 林艳 王天云 王芳
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 真核细胞 质粒还原实验 CaCl2转化法 附着质粒
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 所属期刊栏目: 技术方法
• 页码范围: 584-588,620
• 分类号: Q78
• 字数: 1907字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2012.04.027

摘要

目的:建立一种简单经济的哺乳动物细胞附着体质粒还原实验方法.方法:构建附着体载体,转染中国卵巢仓鼠(CHO)细胞和小鼠脑神经瘤细胞Neuro-2a,利用改良的赫特裂解法提取附着体质粒,CaCI2法转化附着质粒至宿主菌大肠杆菌DH5α,再次从DH5α中提取质粒,将转染前后质粒用Kpn Ⅰ/BamH Ⅰ双酶切和BamH Ⅰ单酶切,并将转染前后的质粒进行DNA测序分析.结果:与最初转染的质粒相比,还原质粒双酶切和单酶切后的条带大小一致；DNA测序分析表明,转染前后质粒中的插入序列相同.结论:建立了可用于质粒还原实验的简单的CaCl2转化方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王天云	新乡医学院生物化学与分子生物学教研室	76	498	10.0	20.0
2	林艳	新乡医学院生物化学与分子生物学教研室	6	3	1.0	1.0
3	李照熙	新乡医学院生命科学技术系	5	2	1.0	1.0
4	王芳	新乡医学院生物化学与分子生物学教研室	39	172	7.0	12.0