转群体感应淬灭基因attM烟草抗青枯病的研究

• 作者: 刘凤权 李婷 杨雪 牛毅 胡白石 范加勤 谷春艳 钱国良
• 来源期刊: 南京农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 转attM基因烟草 青枯病 抗病性
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 64-70
• 分类号: S572|S435.72
• 字数: 5172字
• 语种: 中文

摘要

自根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)克隆获得attM基因.采用叶盘转化法,农杆菌介导转化烟草,经过卡那霉素抗性筛选获得抗性愈伤组织,对其分化产生的植物株系进行PCR、PCR-Southem和荧光定量PCR及GUS染色检测分析.结果表明:attM基因被成功插入烟草基因组DNA中.在转基因株系中均能够表达,相对表达量最大可达125.8,最小为31.0.以野生型烟草和转pB1121空载体的烟草为对照,分别进行了离体及活体检测试验,结果表明:转attM基因烟草植株对茄科雷尔氏菌引起的青枯病抗性显著.1×107～1×108 CFU·mL-1的青枯菌接种离体叶片,野生型烟草和转pB1121空载体的烟草的中毒面积与接种面积比值为15 ～25,转基因植株的比值低于3；青枯菌3×106 CFU·mL-1伤根接种盆栽烟草植株14 d,野生株和转空载体烟草均青枯死亡,病情指数为100,转基因植株病情指数为31.25.