HBx及HBs调节RhoC启动子机制的研究

• 作者: 曲嘉琳 李凯 汤华 王森 盛艳蕊 秦栋栋 邹程程
• 来源期刊: 医学分子生物学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: HBx HBs RhoC 启动子 Ets-1转录因子
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 257-261
• 页数: 5页
• 分类号: R512.6
• 字数: 3953字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1672-8009.2012.04.000

摘要

目的 探讨HBx(hepatitis B virus X protein)及HBs(hepatitis B virus S protein)对RhoC启动子的作用机制,分析可能相互作用的启动子调控元件.方法构建RhoC启动子截短突变克隆,双荧光素酶报告分析系统(the dual-luciferase reporter assay system)检测RhoC启动子相对荧光素酶活性,通过分析启动子相对活性变化进而筛寻到起调控作用的启动子区段.过表达Ets-1转录因子,检测RhoC启动子相对荧光素酶活性.结果①成功构建了5个RhoC启动子截短变异克隆.② 分别在HepG2细胞和HepG2.2.15细胞中验证了RhoC截短变异启动子活性,确定了起关键作用的启动子区段(-491 bp～-320 bp、-124 bp～-58 bp).③ HepG2细胞中分别过表达HBx及HBs,发现启动子区段-491 bp～-320 bp及-187 bp～-124 bp可以被HBx及HBs调控.④文献检索结合软件分析这些启动子区段序列,找到了高度相关的转录因子Ets-1、NF-κΒ、Sp1等.⑤ 荧光素酶检测和Real-time PCR初步验证了转录因子Ets-1对RhoC的调控作用.结论 HBx及HBs可能通过Ets-1等转录因子调控RhoC启动子进而上调RhoC启动子活性.