嗜热菌铁硫簇合成途径中SufB、SufC和SufD蛋白的表达、纯化及其功能初步研究

• 作者: 刘晓晴 张宗棋 王妮莎
• 来源期刊: 首都师范大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 铁硫簇 SufC 融合表达 亲和层析 荧光共振能量转移
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 页码范围: 39-44
• 分类号: Q813
• 字数: 4373字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-9398.2012.01.008

摘要

铁硫簇广泛存在于各种生物中,参与电子传递、底物结合和激活、基因表达和调控等重要功能.本文利用嗜热菌Thermus thermophilus HB8研究铁硫簇合成SUF系统中的三个关键蛋白SufB、SufC、SufD.以HB8的基因组为模板,通过PCR技术获得其su、sufC、sufD三个基因,随后构建了蛋白表达载体sufB-pET28a(+)、sufC-pET28a(+)、sufD-pGEX-6P-1,将其转入大肠杆菌Rosetta( DE3)进行蛋白表达,再利用亲和层析与凝胶过滤层析进行蛋白纯化.随后对SufB、SufC、SufD功能进行了初步研究,证明SufC对ATP具有亲和性,其亲和常数为15.2 μmol/L；证明SufB与SufC在体外具有相互作用,并得到了复合体SufBC,为进一步探讨其作用机制奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张宗棋	首都师范大学生命科学学院	3	1	1.0	1.0
2	王妮莎	首都师范大学生命科学学院	3	1	1.0	1.0
3	刘晓晴	首都师范大学生命科学学院	17	112	6.0	10.0