两种等位基因特异性扩增方法在结肠癌K-ras癌基因点突变检测中的应用比较

• 作者: 张岚 朱德斌
• 来源期刊: 激光生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 实时荧光等位基因特异性扩增 SYBR Green Ⅰ染料 结肠癌 K-ras癌基因 点突变
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 技术研究
• 页码范围: 188-192
• 分类号: Q503|Q78
• 字数: 413字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-7146.2012.02.018

摘要

针对传统电泳检测方法存在操作复杂、费时等缺点,提出一种用于检测K-ras癌基因点突变的实时荧光等位基因特异性扩增(Allele specific amplification,ASA)方法.该法采用突变型引物对结肠癌基因组中的K-ras基因进行等位基因特异性扩增,只有突变型样品能被顺利扩增出双链DNA产物,该产物能与双链DNA染料SYBR Green Ⅰ结合,产生荧光信号从而被检测到.通过对荧光域值和溶解曲线分析来区分不同的基因突变类型.该法可以检测到野生型DNA中含量为1/1 000的突变型DNA,整个检测时间小于1h.我们用该法检测31例结肠癌样品中K-ras基因密码子12发生的点突变,其中有15例检出为阳性.此外,还采用等位基因特异性扩增结合电泳分析对样品进行了检测,并对两种方法进行了比较.结果显示:实时荧光等位基因特异性扩增方法具有操作简便、快速、检测成本低等优点,为临床诊断基因突变引起的疾病提供了一种可行的手段.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张岚	广州医学院医学遗传与细胞生物学教研室	8	15	2.0	3.0