一种斑马鱼肝脏特异表达转基因载体的制备方法

• 作者: 陈元红 陈将飞 靳大庆
• 来源期刊: 温州医学院学报
• 学科: 生物学
• 关键词: To12转座子 斑马鱼 multi-site gateway技术 肝脏特异性表达
• 年，卷（期）: 2012,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 453-457
• 分类号: Q812
• 字数: 4113字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2138.2012.05.010

摘要

目的:建立一套快速制备斑马鱼肝脏特异表达转基因载体的新方法.方法:首先利用multi-site gateway技术将斑马鱼肝脏脂肪酸结合蛋白(fabp10a)启动子片段与入门载体进行BP重组获得启动子的入门克隆pENTR-fabp10a,然后将目的基因克隆到载体pME-MCS中形成入门克隆pENTR-interest,最后通过multi-site gateway技术将pENTR-fabp10a、pENTR-interest和含有EGFP标记基因的p3E-IRES-EGFPpA质粒在To12转座载体pDestTo12pA2上进行定向重组即可获得斑马鱼肝脏特异性表达转基因载体pTo12-fabp10a-interest-IRES-EGFP.本研究采用红色荧光蛋白基因DsRed2作为目的基因,用上述方法构建了转基因载体pTo12-fabp10a-DsRed2-IRES-EGFP,并将其注射至单细胞期斑马鱼胚胎中进行表达分析.结果:转基因载体pTo12-fabp10a-DsRed2-IRES-EGFP在斑马鱼肝脏组织中能实现红色和绿色荧光蛋白同步特异表达.结论:利用To12转座系统以及multi-site gateway技术构建斑马鱼肝脏特异性表达转基因载体是一套行之有效的方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈将飞	浙江省模式生物技术与应用重点实验室温州医学院水域科学与环境生态研究所	1	0	0.0	0.0
2	陈元红	浙江省模式生物技术与应用重点实验室温州医学院水域科学与环境生态研究所	1	0	0.0	0.0
3	靳大庆	国家遗传工程实验室复旦大学生命科学院	1	0	0.0	0.0