小麦幼穗蛋白质双向电泳条件的优化

• 作者: 于松 张保雷 李楠楠 袁凯 高庆荣
• 来源期刊: 基因组学与应用生物学
• 学科: 生物学
• 关键词: 温光敏小麦 小麦蛋白质 TCA/丙酮提取法 酚提取法提取法 双向凝胶电泳 电泳条件优化
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 技术主题
• 页码范围: 84-89
• 分类号: Q510.3
• 字数: 4988字
• 语种: 中文

摘要

本研究以温光敏小麦为试材,用TCA/丙酮和酚提取法提取小麦幼穗蛋白样品,进行了双向电泳优化分析,并对双向电泳过程中出现的问题进行了讨论。结果表明,用TCA/丙酮法提取小麦幼穗蛋白质其产率（浓度）高于酚提取法。SDS-PAGE电泳显示,用TCA/丙酮提取法提取的蛋白质能获得较清晰条带,分辨率较高,而酚提取法提取的蛋白质其条带模糊,分辨率低。对蛋白质纯化除盐可以提高分辨率,减少横竖纹,获得背景清晰的圆形蛋白点。通过ImageMasterTM 2D Platinum5.0软件分析凝胶图谱,结果显示纯化后可降低噪点,纯化后蛋白点数可从未纯化蛋白点数的216增加到583。显然,采用TCA/丙酮法可获得高浓度高质量的蛋白质,而进一步纯化、除盐离子可进一步获得背景清晰可高重复性的电泳图谱。在双向电泳实验过程中,观察到一些异常缺陷胶的出现,如双向电泳图谱中蛋白点扩散,蛋白聚集形成斑点串,没有点或点很少,出现纵纹横纹及图谱扭曲等影响图谱质量的严重问题,本研究对这些问题做了分析并提出了解决方案。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	高庆荣	山东农业大学作物生物学国家重点实验室	45	584	13.0	22.0
2	于松	山东农业大学作物生物学国家重点实验室	3	30	3.0	3.0
3	袁凯	山东农业大学作物生物学国家重点实验室	3	12	2.0	3.0
4	张保雷	山东农业大学作物生物学国家重点实验室	2	12	2.0	2.0
5	李楠楠	山东农业大学作物生物学国家重点实验室	2	12	2.0	2.0