热敏肠毒素促进产肠毒素大肠杆菌对小肠上皮细胞系IPEC-J2的黏附的初步研究

• 作者: 吴娟 朱国强 郁磊
• 来源期刊: 中国动物传染病学报
• 学科: 农学
• 关键词: 热敏肠毒素 黏附 IPEC-J2
• 年，卷（期）: 2012,（6）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 29-35
• 页数: 7页
• 分类号: S852.612
• 字数: 5060字
• 语种: 中文

摘要

本试验利用PCR技术,以K88ac标准株C83902基因组DNA为模板扩增出热敏肠毒素（heat-labile toxins,LT）基因,大小约1.1 kb。将其克隆入表达质粒载体pACYC184,构建和筛选出含正确插入LT基因的pACYC-LT重组质粒。采用同样方法,构建和筛选出两种含点突变LT基因的重组质粒（pACYC-LT72和pACYC-LT192）。进一步将上述重组质粒DNA转化入不表达任何毒素的大肠杆菌SE5000株。GM1-ELISA结果表明,上述重组菌均能在体外正常表达LT毒素蛋白。以猪小肠上皮细胞系IPEC-J2为模型,比较了表达和不表达LT的细菌对细胞黏附性能。数据表明,LT的表达使细菌对肠上皮细胞的黏附效应明显增加（12.3±3.4倍）。两种LT毒素蛋白的单氨基酸突变体的表达证明了LT毒素的ADP核糖基化作用对其增强致病菌对肠细胞的黏附作用是必要的。蛋白激酶A的抑制剂Rp-cAMP、腺苷酸环化酶的抑制剂DDA和LT毒素的受体GM1都可阻断LT毒素对细菌黏附性能的提升作用。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱国强	扬州大学兽医学院	183	1462	21.0	30.0
2	郁磊		1	3	1.0	1.0
3	吴娟		1	3	1.0	1.0