TrkA与snapin蛋白的直接相互作用

• 作者: 崔迎彬 王岚 王欣 陈虹 马晓骊 黄秉仁
• 来源期刊: 医学研究杂志
• 学科: 医学
• 关键词: TrkA snapin 激光扫描共聚焦 荧光共振能量转移 蛋白质相互作用
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 47-50
• 分类号: R346
• 字数: 2448字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-548X.2012.01.015

摘要

目的 确认TrkA与snapin蛋白间的直接相互作用.方法 采用DNA重组技术,构建增强型荧光蛋白表达载体pECFP - TrkAICD(TrkA膜内区)和pEYFP - snapin,共转染HEK 293T细胞后以激光扫描共聚焦显微镜观察并进行荧光共振能量转移(fluorescence resonance energy transfer,FRET)分析.结果 成功构建了snapin和TrkA的重组质粒,共转染细胞后激光扫描共聚焦显微镜分析表明两种蛋白分布在细胞质同一层面,荧光共振能量转移(FRET)分析表明能量转移效率＞5％,与对照相比有显著区别(P＜0.05).结论 激光扫描共聚焦及FRET实验结果都证明了TrkA膜内区与snapin两个蛋白之间存在着直接的相互作用.