分泌型碱性磷酸酶报告基因重组载体pSEAP-IQCE3'UTR的构建

• 作者: 何彬彬 何淑雅 李斌元 王三虎 秦凌雪 苏泽红 马云
• 来源期刊: 医学分子生物学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: FXR1P IQCE SEAP 脆性X综合征
• 年，卷（期）: 2012,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 355-359
• 页数: 5页
• 分类号: Q75|Q78
• 字数: 3107字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1672-8009.2012.h5.008

摘要

目的 构建分泌型碱性磷酸酶(secreted alkaline phosphatase reporter gene,SEAP)报告基因重组载体pSEAP-IQCE3'UTR,为鉴定FXR1P是否是通过与IQCE的3'UTR发生相互作用,进一步探索FXR1P的功能奠定基础.方法 首先设计目的基因片段IQCE3'UTR的PCR引物,然后通过RT-PCR扩增IQCE基因3'UTR基因片段,酶切扩增的片段和报告基因空载体,并将空载体去磷酸化,去磷酸化后的空载体与目的基因片段进行连接反应,将连接产物转化人大肠埃希菌JM109,最后筛选阳性克隆,PCR鉴定插入序列的正反.结果 构建了分泌型碱性磷酸酶报告基因重组载体pSEAP-IQCE3'UTR,经酶切鉴定、正反鉴定和测序分析可知重组载体构建成功.结论 成功构建了分泌型碱性磷酸酶报告基因重组载体pSEAP-IQCE3'UTR,为进一步探索FXR1P的功能及其在脆性X综合征中的发病机理有着重要的意义.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李斌元	南华大学生物化学与分子生物学教研室	28	79	4.0	7.0
2	王三虎	南华大学生物化学与分子生物学教研室	3	1	1.0	1.0
3	马云	南华大学生物化学与分子生物学教研室	41	188	7.0	12.0
4	苏泽红	南华大学生物化学与分子生物学教研室	21	48	5.0	6.0
5	何彬彬	南华大学生物化学与分子生物学教研室	3	4	1.0	2.0
6	秦凌雪	南华大学生物化学与分子生物学教研室	3	1	1.0	1.0