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应用DPO引物技术同时检测5种蚊媒病毒的多重RT-PCR方法
应用DPO引物技术同时检测5种蚊媒病毒的多重RT-PCR方法
作者:
季汝武
岳启安
平芮巾
张丽萍
徐焕洲
杨鹏飞
王琳
胡孔新
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
DPO引物
多重RT-PCR
日本脑炎病毒
黄热病毒
西尼罗病毒
圣路易斯脑炎病毒
登革病毒
摘要:
目的 应用双启动寡核苷酸引物(Dual Priming Oligonucleotide,DPO)技术建立同时检测日本脑炎病毒(Japanese Encephalitis Virus,JEV)、黄热病毒(Yellow Fever Virus,YFV)、西尼罗病毒(West Nile Virus,WNV)、圣路易斯脑炎病毒(St.Louis encephalitis virus,SLEV)和登革病毒(Dengue virus,DV)5种蚊媒病毒的多重RT-PCR方法.方法 利用Primer Premier 5.0软件设计5种病毒的特异性DPO引物,对引物浓度、Mg2+浓度和退火温度进行优化,测定多重RT-PCR反应的特异性和敏感性.结果 应用DPO引物技术建立的多重RT-PCR方法可特异性扩增JEV、YFV、WNV、SLEV和DV的142bp、293bp、377bp、630bp和521 bp基因片段,灵敏度分别为5000PFU/ml、4 500 PFU/ml、2.3×105 copies/μl、2.6×104 copies/μl和1.37×104 copies/μl,蚊虫模拟添加实验未发生非特异反应.结论 应用DPO引物技术建立的针对5种蚊媒病毒的多重RT-PCR检测方法有良好的敏感性和特异性,可以同时对JEV、YFV、WNV、SLEV和DV进行检测.
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应用DPO引物技术同时检测5种蚊媒病毒的多重RT-PCR方法
来源期刊
中国国境卫生检疫杂志
学科
医学
关键词
DPO引物
多重RT-PCR
日本脑炎病毒
黄热病毒
西尼罗病毒
圣路易斯脑炎病毒
登革病毒
年,卷(期)
2012,(2)
所属期刊栏目
实验研究与疾病监测
研究方向
页码范围
73-77
页数
5页
分类号
R183.5
字数
语种
中文
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期刊影响力
中国国境卫生检疫杂志
主办单位:
中国质检报刊社
出版周期:
双月刊
ISSN:
1004-9770
CN:
11-3254/R
开本:
大16开
出版地:
北京市朝阳区麦子店街22号楼
邮发代号:
创刊时间:
1978
语种:
chi
出版文献量(篇)
3243
总下载数(次)
7
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