抗H5N1禽流感病毒羊驼重链单域抗体的制备和功能鉴定

• 作者: 包文静 吴标 夏立亮 王颖 程亚庭 赵国屏
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: H5N1禽流感病毒 重链可变区抗体 包涵体复性 活性鉴定
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 禽流感与免疫
• 页码范围: 137-141,160
• 分类号: R392.11
• 字数: 5518字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2012.02.009

摘要

目的:获得具有中和活性、高特异性和稳定性的抗H5N1禽流感病毒血凝素蛋白(HA)的羊驼重链单域(VHH)抗体.方法:利用pET-22b表达载体诱导表达抗H5N1禽流感病毒HA VHH抗体蛋白,以包涵体形式表达的VHH抗体蛋白采用最优复性方法进行复性后,获得高纯度的VHH抗体,分别采用ELISA法鉴定VHH抗体的亲和力和热稳定性,采用血凝抑制实验鉴定抗体的特异性和体外中和活性.结果:经复性的抗H5N1禽流感HA VHH抗体对H5N1禽流感病毒HA具有良好的特异性.通过对三种不同复性方法比较,利用柱上复性的VHH23抗体具有较好的热稳定性,亲和力为9.1×10-7 mol/L,同时对H5N1禽流感病毒HA具有良好的体外中和活性.结论:实验结果表明通过原核表达获得具有较好中和活性、特异性及稳定性的抗H5N1禽流感病毒VHH抗体,为进一步开展抗体的体内病毒中和试验奠定良好基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	夏立亮	上海人类基因组研究中心上海市疾病与健康基因组重点实验室	1	4	1.0	1.0
2	吴标	上海交通大学医学院上海市免疫学研究所	1	4	1.0	1.0
3	程亚庭	上海人类基因组研究中心上海市疾病与健康基因组重点实验室	1	4	1.0	1.0
4	包文静	上海人类基因组研究中心上海市疾病与健康基因组重点实验室	1	4	1.0	1.0
5	赵国屏	上海人类基因组研究中心上海市疾病与健康基因组重点实验室	4	4	1.0	2.0