金黄色葡萄球菌甲氧西林耐药辅助基因femB的克隆和原核表达

• 作者: 刘文恩 张宁洁 李军 武文君 范学工 邬国军 邹明祥
• 来源期刊: 生命科学研究
• 学科: 医学
• 关键词: 金黄色葡萄球菌 femB基因 基因克隆 融合蛋白
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 223-227
• 分类号: R378.1+1
• 字数: 4291字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-7847.2012.03.007

摘要

金黄色葡萄球菌femB基因与甲氧西林高水平耐药密切相关,可能成为开发抗MRSA药物的新靶位,以金葡菌基因组DNA为模板.PCR扩增emB全长基因,所得片段与pGM-T载体连接并转化感受态大肠杆菌DH5α,阳性克隆以PCR、双酶切及测序鉴定.将鉴定正确的目的片段定向克隆到pGEX--4T-1表达载体中,转化至大肠杆菌BL21后经IPTG诱导表达GST/FemB融合蛋白;采用SDS-PAGE及Western blot对融合蛋白进行鉴定.结果显示,重组质粒在宿主菌中获得了高效表达,融合蛋白相对分子质量为75 kD,该融合蛋白可与抗GST-tag抗体特异结合;表明femB基因的原核表迭系统构建成功,为进一步研究其生物学功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	范学工	中南大学湘雅医院感染病科	227	1554	19.0	25.0
2	邹明祥	中南大学湘雅医院检验科	94	726	15.0	20.0
3	武文君	河南中医学院第一附属医院检验科	2	2	1.0	1.0
4	李军	中南大学湘雅医院检验科	169	978	16.0	24.0
5	邬国军	中南大学基础医学院微生物学系	35	196	9.0	12.0
6	张宁洁	中南大学湘雅医院检验科	9	22	3.0	3.0
7	刘文恩	中南大学湘雅医院检验科	181	1758	20.0	33.0