GAL4/UAS系统在果蝇Tis11基因RNA干扰中的应用

• 作者: 刘勇 张梅超 韦有恒 马维骏
• 来源期刊: 生命科学研究
• 学科: 生物学
• 关键词: Tis11 GAL4/UAS系统 RNA干扰 果蝇
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 207-211
• 分类号: Q812
• 字数: 4163字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-7847.2012.03.004

摘要

TTP在哺乳动物许多关键基因表达的转录后水平上起调控作用,Tis11是TTP蛋白在果蝇中的同源物.目前还没有现成的可用于研究Tis11功能的基因敲除或敲低的果蝇.为了获得肌动蛋白启动子或者热激蛋白启动子驱动表达Tis11 mRNA干扰序列的具有较高干扰效率的Tis11基因干扰果蝇,将肌动蛋白启动子或者热激启动子驱动表达的GALA果蝇品系与融合有Tis11 mRNA干扰序列的UAS品系杂交,收集同时带有GALA基因和UAS序列的子一代果蝇.提取所收集果蝇的总RNA,将其中的mRNA逆转录成cDNA,并设计检测Tis11基因的特异性引物,然后通过Real-time PCR检测Tis11 mRNA的表达情况.结果显示所收集的能表达Tis11基因干扰序列的子一代果蝇与不能表达Tis11基因干扰序列的对照果蝇相比,其体内Tis11 mRNA的表达水平下降明显.收集的果蝇其体内所表达的干扰序列对Tis11 mRNA干扰效果显著,我们成功获得了Tis11基因的RNA干扰果蝇.