浑球红细菌Rhodobacter sphaeroides LHS-305腈水解酶基因的克隆及表达

• 作者: 李明阳 李桂南 王学东
• 来源期刊: 重庆理工大学学报：自然科学
• 学科: 生物学
• 关键词: Rhodobacter sphaeroides LHS-305 腈水解酶 染色体步移
• 年，卷（期）: 2012,（6）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 24-28
• 页数: 5页
• 分类号: Q939
• 字数: 2930字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-8425-B.2012.06.005

摘要

以筛选的产腈水解酶浑球红细菌Rhodobacter sphaeroides LHS-305为出发菌株,根据已知腈水解酶基因保守区域设计简并引物,从总DNA中成功扩增得到腈水解酶基因的部分片段（402 bp）。通过染色体步移扩增片段的上下游序列,经拼接,得到的腈水解酶基因全长为969 bp（在Genebank数据库中的登录号为JN635494）。该基因与已知腈水解酶序列的最高相似性为82%。构建pET28a-nit表达载体,转化大肠杆菌Rosetta（DE3）,得到重组菌。SDS-PAGE电泳结果表明该基因在大肠杆菌中成功表达。重组酶对底物3-氰基吡啶催化结果显示了较高的酶活力,具有跟原始菌相同的特性。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王学东	华东理工大学．生物反应器工程国家重点实验室鲁华生物技术研究所	11	37	3.0	6.0
2	李桂南	华东理工大学．生物反应器工程国家重点实验室鲁华生物技术研究所	1	3	1.0	1.0
3	李明阳	华东理工大学．生物反应器工程国家重点实验室鲁华生物技术研究所	2	13	2.0	2.0