曲古抑菌素A对细胞PANC-1株凋亡和肿瘤转移相关基因表达的影响

• 作者: 刘彪 叶星照 杨云秀 王斯璐 王本泉 白永恒 胡孙宽 陈宗静 陈必成
• 来源期刊: 中国药理学与毒理学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 曲古抑菌素A 胰腺癌 细胞凋亡 Notch通路
• 年，卷（期）: 2012,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 624-629
• 页数: 6页
• 分类号: R966
• 字数: 4207字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3867/j.issn.1000-3002.2012.05.005

摘要

目的 探讨曲古抑菌素A( TSA)诱导胰腺癌细胞PANC-1细胞凋亡机制.方法 TSA 0.1～0.6 μmol·L -1培养PANC-1细胞0～48 h,MTT法检测细胞存活率并计算IC50.TSA 0.4 μmol·L -1 PANC-1 培养0 ～48 h,Hoechst 33258染色观察细胞核形态变化.TSA 0.4 μmol·L-1 PANC-1培养0～12h,检测胱天蛋白酶3活性.TSA 0.4 μmol·L-1与PANC-1培养24 h,实时定量PCR检测c-myc,p53,Bcl-2,Bax,存活素,基质金属蛋白酶1 (MMP1)和基质金属蛋白酶1组织抑制剂(TIMP-1)和Notch-1基因的表达.TSA 0.4和0.6 μmol·L-1与PANC-1培养24 h,细胞免疫化学方法检测Notch-1蛋白的胞内活性形式NICD表达.结果 TSA可以明显抑制PANC-1细胞增殖,12,24和48 h的IC50值分别为0.42,0.32和0.19 μmol·L-1,具有量效(r =0.640,P=0.01)和时效(r=0.768,P=0.002)关系.Hoechst 33258染色结果表明,TSA 0.4 μmol·L-1增加PANC-1细胞核的蓝色荧光并出现凋亡特征.TSA 0.4 μmol·L-1作用4,8和12 h后,胱天蛋白酶3的活性分别为正常对照组的1.62±0.12,2.68±0.17和(3.92±0.23)倍.PCR结果显示,TSA 0.4 μmol·L-1作用24 h后,p53,c-myc和存活素mRNA表达下降,分别为对照组的(18.3±5.1)％,(24.2±0.9)％和(15.8±1.0)％,Bcl-2和Notch-1 mRNA未见明显变化,而Bax,MMP1和TIMP-1 mRNA升高(P＜0.05),Bcl-2/Bax比值降低到正常对照组的(13.0±2.8)％.Notch-1活性分子NICD明显升高(P＜0.05).结论 TSA可通过线粒体途径诱导胰腺癌PANC-1细胞凋亡,而且使Notch-1激活,促进转移相关基因表达.