JNK通路参与曲古抑菌素A诱导的胰腺癌PANC-1细胞凋亡

• 作者: 吴存造 周蒙滔 张玲 王本泉 白永恒 陈宗静 陈必成 黄雪
• 来源期刊: 中国药理学与毒理学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 胰腺癌 曲古抑菌素A JNK通路 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2013,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 801-807
• 页数: 7页
• 分类号: R966|R979.1
• 字数: 4279字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3867/j.issn.1000-3002.2013.05.006

摘要

目的 研究JNK通路在曲古抑菌素A(TSA)诱导人胰腺癌PANC-1细胞凋亡过程中的激活情况,并探讨其机制.方法 PANC-1细胞经TSA 1.0 μmol· L-1与JNK抑制剂(SP600125)20μmol·L-1单独或联合处理24 h后,分别用CCK-8法和Hoechst33258染色法检测对PANC-1细胞的生长和细胞凋亡的作用;荧光定量PCR检测c-Jun,c-fos,Elk1,bax和bcl-2 mRNA表达;Western蛋白质印迹法检测p-c-Jun、p-JNK、bax、活性胱天蛋白酶8、bcl-2和胱天蛋白酶3蛋白表达.结果 CCK-8结果显示,TSA单独处理,PANC-1细胞的存活率随着TSA浓度的增加而降低,并具有一定的量效关系(r=0.9564,P＜0.05).TSA+ SP600125组细胞存活率较TSA单独处理明显增加(P＜0.05).Hoechst33258染色显示,正常对照组、TSA组和TSA+ SP600125组凋亡率分别为(1.8±0.4)％,(6.2±1.4)％和(3.9±0.9)％,组间差异具有明显的统计学意义(P＜0.05,24 h).与TSA组比较,TSA+SP600125组促凋亡基因bax以及JNK通路相关基因c-Jun和c-fos mRNA表达明显降低,Elk1 mRNA表达降低,差异显著(P＜0.05);而抗凋亡基因bcl-2 mRNA表达明显升高(P＜0.05).TSA作用PANC-1细胞1h后激活JNK通路的相关蛋白c-Jun和JNK,并在2h达到最高峰.与TSA组比较,TSA+ SP600125组bax及活性胱天蛋白酶8蛋白的表达明显降低(P＜0.05),bcl-2和胱天蛋白酶3蛋白的表达明显升高(P＜0.05).结论 激活JNK通路是TSA诱导PANC细胞凋亡的重要机制之一,可能是通过影响线粒体凋亡途径发挥作用.