甲苯生物降解的关键酶基因克隆及表达

• 作者: 叶薇 吕建新 杨凯 章婷婷 缪晓燕 陈琼斯
• 来源期刊: 温州医学院学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 恶臭假单胞菌 甲苯 克隆 原核表达
• 年，卷（期）: 2012,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 556-560
• 页数: 5页
• 分类号: Q781|Q786
• 字数: 3568字
• 语种: 中文

摘要

目的:克隆、表达恶臭假单胞菌生物降解甲苯的关键酶基因.方法:恶臭假单胞菌WZ-1在含甲苯的MS培养基中培养以鉴定其降解甲苯的能力.设计引物扩增甲苯生物降解的关键酶——甲苯双加氧酶和邻苯二酚1,2双加氧酶基因,PCR扩增目的片段后进行T-A克隆,筛选阳性克隆并鉴定.构建甲苯双加氧酶-pET28a进行体外诱导表达.结果:恶臭假单胞菌WZ-1在含甲苯的MS培养基的生长曲线证明其具有降解甲苯的能力；通过重组技术获得阳性克隆,并以酶切、DNA测序进行鉴定；IPTG诱导后获得重组甲苯双加氧酶的高表达.结论:成功获得了用于降解甲苯的甲苯双加氧酶基因和邻笨二酚1,2双加氧酶基因,并在体外诱导表达了目的蛋白,为后续利用模式生物对苯系物的生物降解建立了实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吕建新	温州医学院检验医学院	153	1535	21.0	32.0
2	叶薇	温州医学院检验医学院	7	36	3.0	6.0
3	陈琼斯	温州医学院检验医学院	2	1	1.0	1.0
4	杨凯	温州医学院检验医学院	14	100	6.0	9.0
5	缪晓燕	温州医学院检验医学院	1	1	1.0	1.0
6	章婷婷	温州医学院检验医学院	1	1	1.0	1.0