肝脏特异性表达分泌型IgD转基因小鼠模型的构建

• 作者: 位治国 孙亿 戴蕴平 焉博文 王喜凤 王美丽 王萍 程学谦 苟克勉 许晨 郑敏 黄甜
• 来源期刊: 中国科学（生命科学）
• 关键词: sIgD 肝脏特异性表达载体 HIDS MVK
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 所属期刊栏目: 论文
• 页码范围: 286-294
• 页数: 9页
• 语种: 中文
• DOI: 10.1007/s11427-012-4301-3

摘要

现有的遗传学研究认为高IgD综合征(HIDS)与甲羟戊酸激酶(MVK)基因发生突变有关,但具体的发病机制还不清楚,血清中IgD的升高与HIDS临床表征之间的关系还不知道,本研究运用融合PCR的方法构建肝脏特异性高表达嵌合分泌型IgD(csIgD)载体,并通过显微共注射,基因组PCR和Southern blotting鉴定出7只转基因Fo代阳性小鼠.对F1代阳性小鼠在RNA和蛋白质水平分别进行了RT-PCR,Q-PCR和Western blotting,ELISA检测.结果显示,转基因csIgD能够在肝脏特异性表达,并具有遗传稳定性.对阳性小鼠骨髓和脾脏细胞进行的流式分析发现,转基因csIgD的表达并未影响到B细胞的发育.形态解剖学观察,发现一些小鼠出现了皮肤破损和肝脾肾肿大的现象；病理切片显示,肝脾肾组织出现大量的细胞坏死和纤维样蛋白沉淀.TAIL-PCR(thermal asymmetric interlaced PCR)检测结果表明,目的基因片段没有破坏位于小鼠5号染色体的MVK基因.本转基因小鼠模型的构建,有利于进一步对HIDS发病机制进行探讨.