检测牛、羊布鲁菌多重PCR方法的建立与应用研究

• 作者: 云涛 关平原 希尼尼根 张七斤 李平安 申之义
• 来源期刊: 内蒙古农业大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 检测 牛种布鲁菌 羊种布鲁菌 多重PCR
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 所属期刊栏目: 动物科学与动物医学
• 页码范围: 17-20
• 页数: 4页
• 分类号: Q939
• 字数: 3188字
• 语种: 中文

摘要

根据布鲁菌属特异性基因BCSP31和布鲁菌种间特异性标志IS711插入序列,设计合成3对引物,以牛种布鲁菌A19,羊种M5,猪种S2基因组DNA为模版,建立可同时检测布鲁菌属、牛种布鲁菌和羊种布鲁菌的多重PCR方法,并对方法的扩增效果、特异性、敏感性及适用性进行验证.结果显示,牛种布鲁菌可扩增出222bp和615bp两条带,羊种布鲁菌可扩增出222bp和932bp两条带,该方法对牛种布鲁菌A19和羊种布鲁菌M5混合DNA模板的最小检出量为100pg,对葡萄球菌26001株、大肠杆菌O78等7种参照菌的核酸扩增结果均为阴性.应用该方法对19份布鲁菌血清抗体为阳性牛乳样进行检测,结果均为布鲁菌抗原阳性.