猪源牛病毒性腹泻病毒SD0803株细胞传代研究

• 作者: 孙春清 张宏彪 童光志 袁世山 邓宇 韦祖樟 龙进学
• 来源期刊: 中国动物传染病学报
• 学科: 农学
• 关键词: 牛病毒性腹泻病毒 病毒传代 全长测序 Real-timePCR 多步生长曲线
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 22-28
• 页数: 7页
• 分类号: S852.659
• 字数: 3797字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-6422.2012.02.004

摘要

为研究猪源牛病毒性腹泻病毒（Bovine viral diarrhea virus,BVDV）生物学特性,将本实验室分离得到的SD0803毒株在马-达氏牛肾细胞（mardin-darby bovine kidney,MDBK）上连续传40代,提取第40代病毒基因组RNA,设计扩增及测序引物,用RT-PCR方法分5段扩增第40代病毒基因片段,并进行全长测序,利用DNASTAR软件进行序列拼接及分析,与亲代病毒SD0803序列比对分析;用Real-time PCR方法测定第1、10、20、30和40代细胞上清中的病毒复制效率,并绘制多步生长曲线。测序结果表明,第40代病毒与亲代病毒核苷酸序列的同源性为99.8%,氨基酸序列的同源性为99.6%,其中有23处发生核苷酸突变,14处为有义突变,氨基酸变化主要集中在E2和NS5B区域。多步生长曲线显示,传代病毒和亲本病毒均能在MDBK细胞上获得较高的复制效率,并有着相似的生长特性,复制效率基本一致。本次研究为研制猪源BVDV疫苗做好了物质储备,为下一步研究其致病性和抗原性奠定基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	童光志	中国农业科学院上海兽医研究所	168	2158	24.0	40.0
2	袁世山	中国农业科学院上海兽医研究所	33	152	8.0	10.0
3	韦祖樟	中国农业科学院上海兽医研究所	11	35	4.0	5.0
4	龙进学	中国农业科学院上海兽医研究所	8	70	6.0	8.0
5	孙春清	中国农业科学院上海兽医研究所	2	1	1.0	1.0