MAP4K4对肝癌细胞生物学活性的影响及机制

• 作者: 刘安文 张树辉 蔡婧
• 来源期刊: 肿瘤防治研究
• 学科: 医学
• 关键词: MAP4K4 肝癌细胞 siRNA 基因芯片
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 140-145
• 分类号: R735.7
• 语种: 中文
• DOI: 10.3971/j.issn.1000-8578.2012.02.006

摘要

目的 检测MAP4K4对肝癌细胞生物学活性的影响并初步探讨其作用机制.方法 选取四种肝癌细胞(Hep3B,HepG2,SMMC7721,Huh-7)采用实时定量PCR和Western blot方法分别检测MAP4K4 mRNA和蛋白水平的表达.设计靶向MAP4K4的特异性siRNA核苷酸序列质粒转染组及空载体质粒转染组,用Lipofectamine 2000法分别转染到MAP4K4蛋白表达活性最强的肝癌细胞,QRT-PCR和Western blot方法检测干扰效率,并对转染后肝癌细胞进行WST-8细胞增殖实验,平板克隆形成实验,PI染色法细胞周期检测,Annexin V法细胞凋亡检测；对干扰组及对照组细胞进行基因芯片检测,以进一步探究MAP4K4基因在肝癌细胞中可能的作用机制.结果 MAP4K4在各细胞株的表达依次为:HepG2＞ Hep3B＞ Huh-7＞SMMC7721；MAP4K4的干扰效率达50％以上；MAP4K4基因敲减后细胞生长减慢；平板克隆形成能力减弱；细胞周期阻滞于S、G2期；细胞凋亡明显增加；MAP4K4基因敲减后,其上游的基因:TLR3、TLR4、TLR5、TLR6、TLR7、TLR8、MyD88、IRAK、TRAF6、TIRAP的表达明显下调,下游基因TAK1( MAP3 K7)和MKK3的表达也明显下调.结论 MAP4K4基因敲减可以阻滞细胞周期的进程,抑制肝癌细胞的恶性增殖,其机制可能是通过NF-kB信号转导途径、JNK信号转导途径发挥作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘安文	南昌大学第二附属医院肿瘤内科	57	289	10.0	14.0
2	张树辉	上海市岳阳医院病理科	4	10	2.0	3.0
3	蔡婧	南昌大学第二附属医院肿瘤内科	19	131	7.0	11.0