角质形成细胞PAR-2基因siRNA的筛选

• 作者: 张余光 张艳 袁磊 金蓉
• 来源期刊: 组织工程与重建外科杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 角质形成细胞 蛋白酶激活受体-2 RNA于扰
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 69-72
• 分类号: Q784
• 字数: 3607字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-0364.2012.02.003

摘要

目的 设计并筛选能高效抑制人角质形成细胞膜上蛋白酶激活受体-2(PAR-2)基因表达的小干扰RNA(siRNA)序列.方法 根据人PAR-2 mRNA的序列,设计合成3对针对靶基因的不同siRNA.应用脂质体Lipofectamin 2000转染试剂,将3对siRNA转染人角质细胞,半定量RT-PCR技术检测PAR-2mRNA表达水平、Western blot检测PAR-2蛋白表达,以评价干扰效果.结果 设计合成的3对PAR-2 siRNA中有2对siRNA可有效抑制PAR-2基因表达,以第2对siRNA效果为佳.结论 成功设计合成特异且高效阻断PAR-2表达的siRNA,为进一步应用RNAi技术沉默PAR-2基因奠定实验基础.