过表达Baff转基因斑马鱼的构建

• 作者: 刘树锋 张力 谢英
• 来源期刊: 中国比较医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 系统性红斑狼疮 B细胞活化因子 斑马鱼 转基因
• 年，卷（期）: 2012,（11）
• 所属期刊栏目: 技术方法
• 页码范围: 46-49,后插4
• 页数: 5页
• 分类号: R332
• 字数: 2949字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969.j.issn.1671.7856.2012.011.010

摘要

目的 体外克隆斑马鱼baff基因并分别构建pEGFP-C1-baff、pEGFP-N1-baff、pIRES2-EGFP-baff重组质粒,通过胚胎显微注射获得过表达baff的转基因斑马鱼,以探讨其作为人类SLE模型和用于SLE药物筛选的意义.方法 通过RT-PCR法由斑马鱼脾脏克隆出斑马鱼baff基因全长807 bp蛋白编码区域,分别构建baff过表达载体pEGFP-C1-baff,pEGFP-N1-baff 及 pIRES2-EGFP-baff重组质粒,体外细胞转染并通过免疫印迹法验证蛋白表达后,通过胚胎显微注射过表达载体,GFP荧光跟踪并筛选阳性鱼.结果 通过体外细胞转染实验与免疫印迹法验证了pEGFP-C1-baff,pEGFP-N1-baff转染后细胞Baff-GFP融合蛋白的成功表达,通过胚胎显微注射与GFP荧光筛选,成功获得过表达baff的转基因斑马鱼.结论 本研究所构建pEGFP-C1-baff、pEGFP-N1-baff、pIRES2-EGFP-baff重组质粒均可通过显微注射获得过表达baff的阳性转基因斑马鱼,为进一步探讨其作为人类SLE疾病模型的意义及Baff拮抗药物的筛选奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张力	河北医科大学河北省实验动物重点实验室	20	94	6.0	8.0
2	谢英	河北医科大学河北省实验动物重点实验室	6	9	2.0	3.0
3	刘树锋	河北医科大学河北省实验动物重点实验室	7	25	3.0	4.0