软骨形态发生蛋白1诱导瘢痕成纤维细胞表达软骨表型的实验研究

• 作者: 张艳 朱明 柴岗 马晓飞
• 来源期刊: 组织工程与重建外科杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 瘢痕成纤维细胞 软骨细胞 软骨形态发生蛋白1分化
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 78-83
• 分类号: Q813.1+1
• 字数: 4440字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-0364.2012.02.005

摘要

目的 应用软骨形态发生蛋白1 (CDPM1)诱导瘢痕成纤维细胞向软骨细胞分化,探讨其作为烧伤后耳软骨缺损修复的种子细胞的可行性.方法 取瘢痕切除术患者的增生性瘢痕组织,提取瘢痕成纤维细胞,CDPM1诱导培养(2％胎牛血清F-12培养液,CDMP1终浓度为100 ng/mL),设阴性、阳性对照组.Image Plus图像软件观察细胞形态变化;免疫荧光、RT-PCR及Western Blot分析诱导前后的软骨相关Ⅰ、Ⅱ型胶原、Sox9、Aggrecan的表达；对第4代细胞行Micromass法培养诱导,HE染色、免疫组织化学染色及Safranine-O染色对诱导结果进行检测.结果 诱导后瘢痕成纤维细胞由长梭形向多角形转变,Image Plus软件分析示诱导后细胞长宽比例为(1.48±0.21)∶1,与诱导前的(7.21±1.54)∶1相比,差异有统计学意义(P＜0.05)；与软骨细胞的(1.31±0.13)∶1相比,差异无统计学意义(P＞0.05).免疫荧光、RT-PCR、Western Blot结果显示,诱导后瘢痕成纤维表达软骨相关指标Ⅱ型胶原、Sox9、Aggrecan.Micromass诱导后行HE染色显示,诱导后部分细胞出现软骨特征性陷窝结构,免疫组织化学染色显示Ⅱ型胶原阳性染色,Safranine-O染色显示微团块诱导后细胞基质红染.结论 瘢痕成纤维细胞在软骨形态发生蛋白1诱导下可以向软骨细胞分化,有望成为烧伤后耳软骨缺损修复的种子细胞.