虎耳草ISSR反应体系的建立及优化

• 作者: 佘朝文 欧立军 王玉娇 贺安娜
• 来源期刊: 怀化学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: 虎耳草 ISSR—PCR 反应体系 优化
• 年，卷（期）: 2012,（11）
• 所属期刊栏目: 生命科学
• 页码范围: 45-49
• 页数: 5页
• 分类号: R282
• 字数: 2394字
• 语种: 中文

摘要

建立并优化虎耳草ISSR—PCR反应体系和扩增程序，为探讨虎耳草种质资源遗传多样性奠定基础．采用正交设计方法和单因子试验，研究％qDNA聚合酶、dNTP、Mg^2＋、引物、模板DNA、延伸时间及循环次数对PCR扩增的影响．结果表明：虎耳草ISSR—PCR的最佳反应体系为：在25μL的反应体系中含模板DNA35ng，Mg2^＋1．25μmol／L、dNTP380μmol／L、引物1．2μmol／L、TaqDNA聚合酶1．5u．反应程序为：95℃预变性5min；94℃变性1min，50℃（据不同引物的退火温度）退火70s，72℃延伸1．5min，40个循环；72℃延伸10min，4℃保存．经过11份虎耳草种质检验．证明该体系稳定可靠，可用于虎耳草种质资源遗传多样性分析及居群鉴别的研究．

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王玉娇	怀化学院生命科学系	1	0	0.0	0.0