一种快速检测CLN6模型小鼠基因型的方法——高分辨率熔解曲线分析法

• 作者: Nanbert Zhong 曾凡一 王娟 蔡勤 许淼 颜景斌 黄淑帧 龚秀丽
• 来源期刊: 医学分子生物学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 高分辨熔解曲线 神经元蜡样脂褐质沉积症 Cln6模型小鼠
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 161-165
• 分类号: R34
• 字数: 3000字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1672-8009.2012.03.002

摘要

目的 建立利用高分辨率熔解曲线(HRM)分析快速鉴定CLN6(神经元蜡样脂褐质沉积症,ceroid-lipofuscinosis,neuronal 6)小鼠(Cln6基因移码突变)基因型的方法.方法 根据NCBI公布的小鼠cln6序列(NC 00075)设计HRM引物和测序引物,然后采用HRM技术获得高分辨熔解曲线鉴定实验小鼠基因型,同时通过直接测序法进行验证,评价其灵敏性和准确性.结果 181只实验小鼠经HRM检测,共有野生型11只、Cln6基因突变杂合子73只和纯合子97只,HRM结果和直接测序结果完全一致,准确性为100 %.结论 HRM方法检测DNA微小突变时具有操作简便、快速、灵敏,单管避免污染以及准确度高等优点,值得推广.