高分辨率熔解曲线在CRISPR基因编辑检测和基因型鉴定中的应用

• 作者: 吴婉婉 盛哲津 祝献民 薛志刚 贺文 陆平
• 来源期刊: 同济大学学报（医学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 高分辨率熔解曲线 CRISPR 聚合酶链式反应 基因型
• 年，卷（期）: 2018,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 17-21
• 页数: 5页
• 分类号: Q331
• 字数: 3723字
• 语种: 中文
• DOI: 10.16118/j.1008-0392.2018.04.004

摘要

目的 建立一种基于PCR和在线高分辨率熔解曲线(high-resolution melting curve,HRM)分析工具的检测方法,实现对DNA序列微小差异的快速检测.方法 在CRISPR基因编辑检测和基因型鉴定中,采用两步PCR,分别对目的片段进行扩增和富集,并通过免费在线软件对HRM进行分析.结果 HRM分析结果显示,本实验所设计的CRISPR慢病毒系统未能对COS7细胞中的RPE65基因进行有效的基因编辑;而在瘦素突变大鼠的子代基因型中,HRM可以明显区分杂合子和纯合子.结论 HRM能够快速鉴定CRISPR编辑和区分基因型.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陆平	同济大学医学院	8	97	3.0	8.0
2	祝献民	同济大学生命科学与技术学院	8	9	2.0	3.0
3	薛志刚	同济大学医学院	17	18	3.0	4.0
4	贺文	同济大学医学院	1	0	0.0	0.0
5	吴婉婉	同济大学生命科学与技术学院	1	0	0.0	0.0
6	盛哲津	同济大学生命科学与技术学院	9	17	2.0	4.0