稻曲病菌分生孢子实时PCR定量检测方法的建立及初步应用

• 作者: 姜华 孙国昌 张震 杜新法 柴荣耀 毛雪琴 王教瑜 王艳丽 赖朝晖 邱海萍 郑静
• 来源期刊: 中国水稻科学
• 学科: 农学
• 关键词: 稻曲病菌 分生孢子 实时PCR 核糖体转录间隔区
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 所属期刊栏目: 实验技术
• 页码范围: 500-505
• 分类号: S431.9|S435.111.4+6
• 字数: 3733字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-7216.2012.04.017

摘要

根据稻曲病菌核糖体转录间隔区(ITS)序列的特异性,设计了2对引物及相应TaqMan探针用于建立稻曲病菌实时PCR定量检测技术.结果表明,uvr292rf/uvr397rr/uvrp333组合建立的体系可特异性检测出稻曲病菌,扩增基线平整,指数扩增期明显,重现性好,最低可检出24 fg的稻曲病菌基因组DNA模板量;以梯度稀释分生孢子液提取的基因组DNA为模板,建立孢子数量常用对数值与C值的线性关系,理论上最低可检测出0.67个分生孢子.对3个时间点的田间孢子捕捉样品进行检测,结果显示不同月份间稻曲病菌孢子数量存在差异.