稻曲病菌分生孢子高产突变体A2588的T-DNA插入位点侧翼基因分析

• 作者: 于俊杰 俞咪娜 刘永锋 尹小乐 聂亚锋 胡建坤 陈志谊 黄磊
• 来源期刊: 中国农业科学
• 关键词: 稻曲病菌 分生孢子 ATMT转化 spo76
• 年，卷（期）: 2013,（24）
• 所属期刊栏目: 植物保护
• 页码范围: 5132-5141
• 页数: 10页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2013.24.007

摘要

[目的]克隆稻曲病菌（Ustilaginoidea virens）分生孢子高产突变菌株 A2588的 T-DNA 插入突变基因，解析该基因在稻曲病菌分生孢子形成中的功能，为进一步揭示稻曲病菌的分生孢子形成机制提供理论基础。[方法]测定 A2588的产分生孢子能力、孢子萌发率、菌丝直线生长能力和热敏感性等生物学特性，利用hiTAIL-PCR、RACE和半定量PCR等方法克隆T-DNA插入突变基因，并结合生物信息学方法分析T-DNA插入导致分生孢子产量提高的分子机理。[结果]与稻曲病菌野生型菌株70-22相比，突变菌株A2588在PS培养液中产生数量为10倍以上的分生孢子，在MM培养液中产生数量约20倍的分生孢子，其在PS培养液中培养的菌球较为致密；在PSA和MM固体培养基上A2588产孢周期较短，孢子萌发率较低，虽然菌丝生长速度无明显差异，但热处理后菌丝不能恢复正常生长速率。hiTAIL-PCR和RACE法克隆了A2588中T-DNA侧翼基因，并利用RT-PCR检测侧翼基因表达水平，结果表明T-DNA侧翼基因spo76表达水平下降，进一步分析发现T-DNA可能插入至spo76的启动子区域，从而破坏了该基因启动子的部分功能。[结论]稻曲病菌突变菌株A2588中，T-DNA插入导致spo76启动子功能部分缺失，spo76表达水平下降，可能使A2588产孢周期缩短，并产生更多分生孢子。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈志谊	江苏省农业科学院植物保护研究所	162	3643	34.0	51.0
2	于俊杰	江苏省农业科学院植物保护研究所	24	249	12.0	14.0
3	尹小乐	江苏省农业科学院植物保护研究所	20	233	12.0	14.0
4	俞咪娜	江苏省农业科学院植物保护研究所	17	164	9.0	12.0
5	胡建坤	江苏省农业科学院植物保护研究所	6	61	5.0	6.0
6	聂亚锋	江苏省农业科学院植物保护研究所	35	341	12.0	17.0
7	黄磊	江苏省农业科学院植物保护研究所	3	26	3.0	3.0