副猪嗜血杆菌分离株hhdA和hhdB基因的克隆及同源性分析

• 作者: 宋帅 庞木生 李春玲 李淼 臧莹安 陈国开
• 来源期刊: 中国兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 副猪嗜血杆菌 hhdA基因 hhdB基因 克隆 序列分析
• 年，卷（期）: 2012,（11）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 1662-1668
• 分类号: S852.612
• 语种: 中文

摘要

用预先设计好的hhdA和hhdB基因的PCR扩增引物，扩增不同血清型的副猪嗜血杆菌分离株中的hhdA和hhdB基因，将扩增产物与克隆载体pMD ^TM18-T连接，转化入感受态细胞DH5α，通过PCR、双酶切及序列测定，测序结果表明：扩增的16株HPS菌中有11株能扩增出hhdA基因，其中10株有测序结果，该10株菌的hhdA基因全基因序列有7种长度，分别为1754、1755、1758、1759、1760、1761和1762bp。另外，16株HPS菌中有9株能扩增出hhdB基因，该9株菌的hhdB基因全基因序列有7种长度，分别为1628、1637、1639、1640、1641、1646和1647bp。对于相同血清型的不同菌株来说，它们的2段目的基因序列长度两两不一致。强毒株中，71％的菌株均能扩增出hhdA和hhdB基因；中毒型菌株也基本可以扩增出hhdA和hhdB基因；而无毒型菌株均没有扩增出目的基因。同源性比对可知：所分离菌株的hhdA之间和hhdB基因之间，以及它们分别与GenBank中副猪嗜血杆菌SH0165的hhdA和hhdB基因之间序列同源性都在98％以上，说明所分离的菌株中均含有hhdA和hhdB基因序列。同源系统进化树分析可知，hhdA和hhdB基因在分离菌菌株间具有良好的保守性，可作为研制HPS新型疫苗的候选基因。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈国开	仲恺农业工程学院动物科学系	5	21	2.0	4.0
2	臧莹安	仲恺农业工程学院动物科学系	35	122	6.0	8.0
3	庞木生	仲恺农业工程学院动物科学系	9	37	4.0	5.0
4	宋帅		1	4	1.0	1.0
5	李淼		1	4	1.0	1.0