副猪嗜血杆菌 hhdA克隆、抗原表位预测和表达

• 作者: 刘悦欣 曾文斌 王萍 聂小伟 谢巧 黄冬艳
• 来源期刊: 江西农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 副猪嗜血杆菌 hhdA 克隆 抗原表位 原核表达
• 年，卷（期）: 2015,（3）
• 所属期刊栏目: 动物科学
• 页码范围: 512-516,563
• 页数: 6页
• 分类号: S852.61+2
• 字数: 3991字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13836/j.jjau.2015079

摘要

根据GenBank中的副猪嗜血杆菌hhdA的基因序列，设计并合成l对特异性引物，对从江西分离的HPS的hhdA基因进行扩增、克隆、测序、生物信息学分析和原核表达。测序结果表明，扩增的目的基因大小为1797 bp，共编码氨基酸599个氨基酸。与GenBank上公布的ZJ0906株（ CP005384．1）中对应的核苷酸序列同源性为99．8％，氨基酸同源性99．6％。生物信息学分析表明，HPS hhdA蛋白是一种混合型结构蛋白，含有α－螺旋、β－折叠、β转角和无规则卷曲；综合柔性区域、亲水性位点、抗原指数和表面可能位点预测了hhdA蛋白可能的B细胞抗原表位的优势表位。将目的基因转入原核表达载体pET－32a（＋）构建重组原核表达质粒pET－32a（＋）－hhdA，将重组质粒转化到BL21（ DE3）中，进行IPTG诱导表达，经过SDS－PAGE电泳结果显示表达的融合蛋白约80 kD。为进一步研究HPS hhdA生物学功能及抗体制备和开发hhdA基因工程产品奠定了基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王萍	江西农业大学动物科学技术学院	74	444	14.0	17.0
2	黄冬艳	江西农业大学动物科学技术学院	23	45	4.0	5.0
3	曾文斌	江西农业大学动物科学技术学院	11	35	3.0	5.0
4	刘悦欣	江西农业大学动物科学技术学院	12	38	3.0	5.0
5	聂小伟	江西农业大学动物科学技术学院	1	1	1.0	1.0