重组人IL-18-EGF 的双顺反子表达及其对NK细胞和肝癌细胞的影响

• 作者: 叶巍 吕建新 文杰 洪德芳 艾冬冬 钟连进
• 来源期刊: 中国细胞生物学学报
• 关键词: IL-18-EGF 肿瘤靶向因子 肝癌细胞 NK细胞 迁移 侵袭
• 年，卷（期）: 2012,（8）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 781-788
• 页数: 8页
• 语种: 中文

摘要

构建重组人IL-18-EGF肿瘤靶向分子双顺反子原核表达系统,研究重组人IL- 18-EGF融合蛋白对人自然杀伤细胞(natural killer cell,NK细胞)和人肝癌细胞(SMMC-7721)的影响.构建重组人IL- 18-EGF原核双顺反子表达系统pET28a(+)-proIL- 18-EGF-Caspase-4/BL21,重组蛋白经纯化后,作用于NK细胞,应用CCK-8法和ELISA试剂盒分别检测NK细胞的增殖情况和IFN-γ的分泌量.Cy3荧光标记IL-18-EGF检测融合蛋白与肿瘤细胞表面EGFR的结合情况.IL- 18-EGF与NK细胞共同孵育24 h后,取培养上清液作用于人肝癌细胞SMMC-7721,分别使用细胞划痕实验和Transwell小室实验检测IL- 18-EGF对肝癌细胞迁移和侵袭能力的影响.实验结果显示:重组人IL-18-EGF能加快NK细胞的增殖,促进NK细胞分泌IFN-γ; IL- 18-EGF能与肿瘤细胞表面EGFR特异性结合;细胞划痕实验中,重组人IL- 18-EGF组空白区域的抗填充能力高于对照组;Transwell小室实验中,12,24,48 h时IL- 18-EGF组细胞穿膜数分别为94.64±2.9、101.8+4.0和116.2+4.5,均显著低于相应时间的对照组(分别为128.6±8.5、133.0±7.5和138.8±5.4)(P＜0.05).以上结果表明,IL- 18-EGF对人肝癌细胞SMMC-7721的迁移和侵袭能力有明显的抑制作用,能提高机体的免疫能力,有可能作为辅助药物运用于肝癌的治疗.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吕建新		153	1535	21.0	32.0
2	钟连进		4	13	2.0	3.0
3	文杰		2	0	0.0	0.0
4	叶巍		1	0	0.0	0.0
5	洪德芳		1	0	0.0	0.0
6	艾冬冬		1	0	0.0	0.0