人IL-1β重组表达载体在肝癌细胞的表达及对其NK细胞杀伤敏感性的影响

• 作者: 梁淑娟 潘继红 牟东珍 肖伟玲 鞠吉雨
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: IL-1β 肝癌细胞 NK细胞 天然免疫逃逸 促炎性细胞因子
• 年，卷（期）: 2007,（8）
• 所属期刊栏目: 肿瘤免疫学
• 页码范围: 688-692
• 页数: 5页
• 分类号: R392.1
• 字数: 4115字
• 语种: 中文

摘要

目的:构建全长人IL-1β真核表达载体,转染H7402肝癌细胞,分析对其NK细胞杀伤敏感性的影响.方法:RT-PCR法扩增人IL-1β基因全长编码序列,经T-A克隆,构建pIRES2-EGFP-IL-1β重组表达载体,采用阳离子聚合物jetPEI的方法转染H7402肝癌细胞,G418筛选获得稳定表达的细胞克隆,RT-PCR分析IL-1β的表达水平,MTT方法分析转染前后NK细胞对肝癌细胞杀伤活性的变化.结果:从LPS处理的人外周PBMCs总RNA中扩增出IL-1β(大小约829 bp),先构建pMD18-IL-1β克隆载体, DNA序列鉴定正确后,利用Pfu DNA聚合酶将IL-1β基因亚克隆到pIRES2-EGFP中,构建真核表达载体pIRES2-EGFP-IL-1β,经PCR、限制性酶谱分析(BamH Ⅰ和EcoR Ⅰ)和DNA序列测定正确后,将其转染H7402肝癌细胞,G418筛选获得稳定表达IL-1β的细胞,与转染空载体的细胞相比,该细胞对NK-92细胞杀伤的敏感性显著降低,效靶比10∶ 1时下降了约30%.结论:促炎性细胞因子IL-1β能够显著增强肝癌细胞对NK细胞杀伤的抵抗性,可能是导致肝癌细胞发生天然免疫逃逸的重要机制.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	牟东珍	山东省潍坊医学院分子免疫学重点实验室	5	13	3.0	3.0
2	鞠吉雨	山东省潍坊医学院分子免疫学重点实验室	2	8	2.0	2.0
3	梁淑娟	山东省潍坊医学院分子免疫学重点实验室	1	3	1.0	1.0
4	潘继红	山东省潍坊医学院分子免疫学重点实验室	1	3	1.0	1.0
5	肖伟玲	山东省潍坊医学院分子免疫学重点实验室	1	3	1.0	1.0