SIRT1对肝癌细胞耐药敏感性的影响

• 作者: 周军年 岳文 张彪 曾泉 王海洋 纪光红 范增 阎新龙 黄映辉
• 来源期刊: 军事医学
• 学科: 医学
• 关键词: 沉默信息调节因子样蛋白1 RNA干扰 基因敲除 肝癌 耐药 间充质干细胞 聚合酶链反应
• 年，卷（期）: 2017,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 90-95
• 页数: 6页
• 分类号: R735.7|R979.1
• 字数: 4413字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7644/j.issn.1674-9960.2017.02.003

摘要

目的 构建沉默信息调节因子(silent information regulaor,Sir)样蛋白1(Sirtuin 1,SIRT1)的特异性短发夹RNA(shRNA)慢病毒载体,获得敲低SIRT1的肝癌细胞系,以探讨其对肝癌细胞的增殖和耐药敏感性的作用.方法 设计针对SIRT1靶点特异性的干涉序列,连接到经HpaⅠ和XhoⅠ双酶切的pSicoR-GFP载体,慢病毒包装293T产生病毒,感染肝癌细胞,建立肝癌细胞SIRT1低表达的稳定株.利用实时定量PCR检测SIRT1的干涉效果;通过平板克隆形成实验、CCK8细胞增殖实验检测SIRT1被干涉后对肝癌细胞增殖能力的影响;通过细胞耐药敏感性实验及实时定量PCR检测耐药基因的表达,考察SIRT1干涉对肝癌细胞耐药敏感性的影响.结果 实时定量PCR实验证明该慢病毒干涉载体能显著抑制肝癌细胞中SIRT1的表达,SIRT1干涉可抑制肝癌细胞的增殖能力,下调耐药基因的表达,增强肝癌细胞的药物敏感性.结论 SIRT1抑制肝癌细胞耐药性.