Real-timeqPCR检测鸡胚中贝氏隐孢子虫方法研究

• 作者: 宁长申 张云 张素梅 张龙现 赵青玉 黄磊
• 来源期刊: 中国兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: real—time qPCR 贝氏隐孢子虫 鸡胚
• 年，卷（期）: 2012,（11）
• 所属期刊栏目: 人兽共患病
• 页码范围: 1674-1678
• 分类号: S852.723
• 语种: 中文

摘要

为检测鸡胚中贝氏隐孢子虫，本研究根据GenBank公布的贝氏隐孢子虫和原鸡18SrRNA基因序列设计针对贝氏隐孢子虫的特异性引物，并以贝氏隐孢子虫卵囊基因组DNA为模板，建立检测贝氏隐孢子虫SYBRGreen实时荧光定量PCR（Real—timeqPCR）方法，同时对贝氏隐孢子虫在鸡胚中培养7d后尿囊膜和尿囊液样品中虫体DNA进行检测。结果表明，建立的SYBRGreenreal—timeqPCR方法可特异性检测到贝氏隐孢子虫，建立的标准曲线线性关系良好（R2=0．998），卵囊基因组DNA检测阈值为10个卵囊，重复检测结果显示试验重现性较好。该方法成功检测到尿囊膜和尿囊液中虫体DNA。本研究建立了快速、特异的定量检测鸡胚中贝氏隐孢子虫real—timeqPCR方法，可用于对贝氏隐孢子虫在鸡胚中繁殖规律分析和抗隐孢子虫药物筛选等研究。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张龙现	河南农业大学牧医工程学院	251	1359	18.0	24.0
2	宁长申	河南农业大学牧医工程学院	196	1115	16.0	22.0
3	张素梅	河南农业大学牧医工程学院	110	653	14.0	21.0
4	黄磊	河南农业大学牧医工程学院	15	37	4.0	5.0
5	张云	河南农业大学牧医工程学院	6	7	2.0	2.0
6	赵青玉	河南农业大学牧医工程学院	1	0	0.0	0.0