CD147慢病毒载体对兔外周血单核巨噬细胞的沉默作用

• 作者: 李运田 李雪杰 杜大勇
• 来源期刊: 军医进修学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: 细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(CD147) RNA干扰 慢病毒载体
• 年，卷（期）: 2012,（7）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 751-753
• 分类号: R34
• 字数: 2704字
• 语种: 中文

摘要

目的 设计合成干扰细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(CD147)基因表达并筛选出能高效抑制兔外周血单核/巨噬细胞中CD147表达的shRNA慢病毒表达载体.方法 根据兔源CD147mRNA的序列构建慢病毒表达载体,实验分为6组:空白对照组,阴性对照组(NC),构建4对干扰CD147基因表达的shRNA慢病毒组(A、B、C、D),并转染兔外周血单核/巨噬细胞,72h后通过荧光显微镜观察转染效果,采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)和Elisa,观察CD147mRNA和蛋白表达情况.结果 转染后72h收集细胞,空白对照组CD147mRNA相对表达量为(0.98±0.09),CD147蛋白表达(119.69±16.40)pg/ml,NC对照组(1.00±0.05)pg/ml及(115.66±13.88)pg/ml,4对shRNA慢病毒载体组分别为A组(0.42±0.03)pg/ml及(58.74±5.11)pg/ml、B组(0.56±0.04)pg/ml及(70.99±7.42)pg/ml、C组(0.63±0.08)pg/ml及(82.79±7.71)pg/ml、D组(0.53±0.04)pg/ml及(69.71±5.84)pg/ml.设计合成的4对shRNA慢病毒载体中A组可以特异性抑制巨噬细胞中CD147mRNA和蛋白表达,分别减少57.72%和50.92%(P<0.05).结论 成功构建了针对CD147基因的shRNA慢病毒载体,并从中筛选出能特异且高效阻断CD147表达的shRNA.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李运田	南方医科大学研究生院	45	171	7.0	11.0
3	杜大勇	解放军第305医院心脏病中心	27	101	6.0	8.0
4	李雪杰	南方医科大学研究生院	2	5	1.0	2.0