β-甘露聚糖酶基因在枯草芽孢杆菌中的克隆及表达

• 作者: 刘项羽 张显 徐美娟 杨套伟 饶志明
• 来源期刊: 应用与环境生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: β-甘露聚糖酶 枯草芽孢杆菌 信号肽 克隆 表达 重组菌株 酶学性质
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 672-677
• 页数: 6页
• 分类号: Q939.97|Q78
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1145.2012.00672

摘要

从Bacillus subtilis JNA 3-10中克隆出β-甘露聚糖酶基因成熟肽链编码序列manA1和含信号肽的β-甘露聚糖酶基因manA2,在B.subtilis 168中克隆表达,分别筛选获得高效分泌表达β-甘露聚糖酶的重组菌株BPM1001(pMA5-manAl/B.subtilis 168)和BPM1002(pMA5-manA2/B.subtilis 168),结果表明菌株BPM1002总酶活力是菌株BPM1001的9.65倍,是原始菌株的13.1倍.在基因manA2下游引入His序列克隆出β-甘露聚糖酶基因manA3,获得枯草芽孢杆菌168重组菌株BPM1003.采用Ni-NTA柱纯化重组菌株BPM1003分泌表达的β-甘露聚糖酶,并研究其酶学性质,该酶促反应的最适pH为6.5,最适温度为65℃,在37 ℃条件下保存一个月酶活力依然保留有77.8％.5 L发酵罐放大实验结果表明魔芋粉对于产β-甘露聚糖酶具有明显的诱导作用,酶活力最高可达2748.82 U/mL.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	饶志明		107	599	12.0	20.0
2	徐美娟		51	125	6.0	9.0
3	杨套伟		35	50	3.0	6.0
4	张显		42	98	6.0	9.0
5	刘项羽		1	0	0.0	0.0