枯草芽孢杆菌β甘露聚糖酶的克隆表达及重组酶性质研究

• 作者: 任立伟 吕育财 张丹阳 田毅红 郭金玲 龚大春
• 来源期刊: 食品工业科技
• 学科: 工学
• 关键词: β-甘露聚糖酶 枯草芽孢杆菌 克隆 表达 酶学性质
• 年，卷（期）: 2020,（6）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 88-93,105
• 页数: 7页
• 分类号: TS201.4
• 字数: 4108字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13386/j.issn1002-0306.2020.06.015

摘要

为实现对魔芋葡甘聚糖具有高度专一性的β-甘露聚糖酶基因的异源表达,从枯草芽孢杆菌G1中克隆出β-甘露聚糖酶基因BsmanA,将该基因与表达载体pACYCDuet-1连接并转化到E.coil BL21(DE3)中.结果表明:该β-甘露聚糖酶基因BsmanA序列全长为1098 bp,编码366个氨基酸;经Ni柱亲和层析纯化后,测得重组酶分子量大小为38 kD;酶学性质研究结果显示:该酶促反应的最适温度为60℃,最适pH为6.5,在温度50～70℃间,pH4.5～7.0的范围内能保持较好的稳定性.本研究实现了β-甘露聚糖酶的异源表达,为生物催化制备低聚甘露糖的工业化提供了新的选择.