多花黄精ISSR反应体系的建立及正交优化设计

• 作者: 张红梅 汤锋 王进 邵元华 项艳 龙甜甜
• 来源期刊: 安徽农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 多花黄精 ISSR 正交设计 反应体系 优化 退火温度
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 茶与食品科学
• 页码范围: 412-416
• 分类号: S567.23
• 语种: 中文

摘要

通过对多花黄精ISSR-PCR反应中的Taq酶、buffer(Mg2+)、模板DNA、dNTP以及引物5个关键因素进行了5因素4水平的正交设计试验,确立了适合多花黄精基因组DNA的稳定性强、扩增最多数量谱带的ISSR-PCR最优反应体系,即25 μL的反应体系中含有1.0 U Taq DNA聚合酶,3.5 mmol·L-1 buffer (Mg2+),80 ng模板DNA,0.08 mmol·L-1 dNTP和0.16 μmol·L-1引物,采用建立的多花黄精ISSR-PCR最佳反应体系进行退火温度梯度试验,确定了引物UBC841的最适退火温度为54.8℃,且最适退火温度因引物而异.这一优化的ISSR-PCR反应体系的建立为今后利用ISSR技术进行黄精种质资源分类、遗传图谱构建和基因定位奠定了良好的技术基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	项艳	安徽农业大学林学与园林学院	65	674	16.0	22.0
2	汤锋		82	843	13.0	25.0
3	王进		37	531	11.0	22.0
4	张红梅	安徽农业大学林学与园林学院	2	14	2.0	2.0
5	邵元华	安徽农业大学林学与园林学院	1	8	1.0	1.0
6	龙甜甜	安徽农业大学林学与园林学院	2	14	2.0	2.0