强直性脊柱炎患者骨髓间充质干细胞的生物学及免疫学特性

• 作者: 任明亮 余嘉洪 刘冬斌 刘鹄 李辉 杨睿 王潇娉 王鹏
• 来源期刊: 中国脊柱脊髓杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 强直性脊柱炎 骨髓间充质干细胞 生物学特性 免疫学特性
• 年，卷（期）: 2012,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 559-565
• 分类号: R593.23|R363.1
• 字数: 5227字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-406X.2012.06.16

摘要

目的:探讨强直性脊柱炎(AS)患者骨髓间充质干细胞(BMSCs)的生物学及免疫学特性,为进一步阐明AS的发病机制和寻找新的治疗靶点提供理论依据.方法:选取37例活动期AS患者(AS组),男34例,女3例,平均年龄(24.3±5.4)岁,HLA-B27均为阳性;49例健康志愿者作为对照组(HD组),男43例,女6例,平均年龄(25.7±4.9)岁；其中HLA-B27阴性44例(HD1组),HLA-B27阳性5例(HD2组).从每例受检者髂后上棘穿刺采集骨髓组织,分离BMSCs,培养扩增至第3代,以l×l04/ml的浓度接种于96孔板中,100μ,l/孔,从第1天开始每日取3 孔进行细胞计数,共计12d,绘制生长曲线；每日取3孔经MTT处理后测定吸光度值,绘制细胞活力曲线,观察BMSCs的生物学特性.使用流式细胞仪检测各受检者BMSCs的细胞表面表型.将第3代BMSCs细胞接种于U形底96孔板,培养4h后使用60Co照射30Gy;取健康志愿者外周血采用密度梯度法分离单个核细胞(PBMCs),加入细胞培养液,计数后按BMSCs:PBMCs 1∶20、1∶10、1∶5、1∶2、1∶1的比例接种于已接种BMSCs的96孔板,共培养5d,观察双向混合淋巴细胞反应情况;同样获取PBMCs,计数后同样以5个比例接种于96孔板,加入植物血凝素(PHA)4μg/m1,充分接触后共培养5d,观察淋巴细胞增殖反应情况.对组间进行统计学比较.结果:AS组、HD1和HD2组第3代BMSCs体外培养1～12d时的增殖能力、细胞活力无显著性差异(P＞0.05)；三组细胞表面表型均为高水平表达CD105、CD73和CD90,不表达CD45、CD34、CD14和HLA-DR.HD1组和HD2组BMSCs与不同比例PBMCs共培养的双向混合淋巴细胞反应和PHA刺激的淋巴细胞增殖反应均无显著性差异(P＞0.05);AS组与HD组比较有显著性差异(P＜0.05).结论:AS患者BMSCs的生物学特性无明显改变,但其免疫调节功能明显下降,其可能在AS的发病机制中扮演重要角色.