小鼠骨髓间充质干细胞的分离、培养、纯化及鉴定

• 作者: 伏鑫 张海玉 王广义 赵继学
• 来源期刊: 中国实验诊断学
• 学科: 生物学
• 关键词: 骨髓间充质干细胞 细胞培养 鉴定 小鼠
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 11-13
• 分类号: Q78
• 字数: 2521字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-4287.2012.01.004

摘要

目的 探讨分离、培养、纯化和鉴定小鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)方法,观察MSCs体外生长特征.方法 取小鼠胫骨和股骨,取出骨髓细胞,用1.073 g/ml的Percoll分离液梯度离心,培养皿培养、换液除去非贴壁细胞,获得MSCs,通过传代对MSCs进行纯化和扩增培养.进行形态学观察,测定生长曲线,用流式细胞仪检测P3代MSCs细胞周期及表面抗原.结果 新分离的MSCs呈小圆形,形态规整.培养传代后,细胞大小均匀,形态较一致,多为梭形.P1、P2、P3代MSCs生长曲线均呈S型.P3代MSCs 75.27%的细胞处于G0-G1期.P3代MSCs CD44表达阳性,表达率为88.71%,CD34表达阴性.结论 利用密度梯度离心法联合贴壁培养法分离纯化骨髓MSCs,在含15%FBS的DMEM-LG培养基中培养MSCs,可获得稳定生长的昆明小鼠MSCs.培养的MSCs细胞系性状稳定,表型稳定均一,适于做进一步研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张海玉	吉林大学第一医院儿外科	30	145	7.0	10.0
2	赵继学	吉林大学第一医院儿外科	34	116	6.0	10.0
3	王广义	吉林大学第一医院普外科	338	1618	17.0	26.0
4	伏鑫		1	12	1.0	1.0