水稻黑条矮缩病毒RT-LAMP快速检测方法的建立

• 作者: 周彤 周益军 杜琳琳 范永坚
• 来源期刊: 中国农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 水稻黑条矮缩病毒 RT-LAMP 检测
• 年，卷（期）: 2012,（7）
• 所属期刊栏目: 植物保护
• 页码范围: 1285-1292
• 分类号: S435.111.4
• 语种: 中文
• DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2012.07.006

摘要

[目的]建立一种快速、灵敏的逆转录环介导等温扩增方法( RT-LAMP)检测寄主植物和传毒介体体内的水稻黑条矮缩病毒(Rice black-streaked dwarf virus,RBSDV).[方法]合成4条针对RBSDV S10核苷酸序列6个位点的特异性引物.分别对引物浓度、MgSO4浓度、反应温度和时间进行优化.将感病水稻总RNA梯度稀释后进行灵敏性检验并与RT-PCR比较分析.选择RBSDV和南方水稻黑条矮缩病毒(SRBSDV)验证该方法的特异性.用本RT-LAMP方法检测田间病株.[结果]RT-LAMP检测方法可排除SRBSDV的干扰而特异地检测植物和飞虱体内的RBSDV,与RT-PCR灵敏性基本一致.检测结果易于判定.[结论]RT-LAMP检测方法适合寄主植物和介体体内RBSDV的快速检测.