大黄鱼肝表达抗菌肽2基因的克隆和原核表达

• 作者: 孙爱飞 蔡灿 薛良义
• 来源期刊: 生物学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 大黄鱼 肝表达抗菌肽2 基因克隆 原核表达
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 55-59,73
• 分类号: Q753
• 字数: 5063字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-1736.2012.04.055

摘要

抗菌肽是在多种细胞中表达具有抗菌活性的肽类物质的总称,在免疫反应中发挥着非常重要的作用.通过同源克隆法克隆到大黄鱼肝脏表达的抗菌肽2(liver-expressed antimicrobial peptide-2,LEAP-2)基因的完整开放阅读框(Opening Reading Frame,ORF).克隆到的大黄鱼LEAP-2全长2236 bp,包含外显子Ⅰ78 bp,内含子Ⅰ880 bp,外显子Ⅱ179 bp,内含子Ⅱ1044 bp,外显子Ⅲ55 bp,编码序列312 bp,编码103个氨基酸.推断的氨基酸序列羧基端区域存在高度保守的4 个半胱氨酸残基,符合LEAP-2超家族的结构特征.同源性对比后显示LEAP-2基因在进化上高度保守,大黄鱼LEAP-2推断的氨基酸序列与牙鲆、黄颡鱼、蓝色鲶鱼和斑点叉尾鮰等鱼类之间的同源性均在95%以上.将大黄鱼LEAP-2 cDNA连接到pET-32a(+),构建了重组表达质粒pET-32a-LEAP-2,将其转化到大肠杆菌BL21上并用1.0 mmol/L IPTG诱导表达,获得了大小约为27 kDa的重组蛋白,与预期的一致.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	薛良义	宁波大学生命科学与生物工程学院	82	601	14.0	21.0
2	孙爱飞	宁波大学生命科学与生物工程学院	7	39	5.0	6.0
3	蔡灿	宁波大学生命科学与生物工程学院	3	13	2.0	3.0