p53RFP表达载体的构建及其对HEK293A细胞增殖的抑制作用

• 作者: 吴平生 张艺军 王月刚 裴静娴 赖文岩
• 来源期刊: 中国医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: p53RFP 表达载体 HEK293A
• 年，卷（期）: 2012,（6）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 494-496
• 分类号: R3
• 字数: 2632字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0258-4646.2012.06.004

摘要

目的 构建p53 RFP表达载体,观察p53RFP表达上调对HEK293A细胞生长的影响.方法 利用DNA克隆技术,将人p53RFP基因的编码序列克隆至质粒pcDNA4/Myc-HisA,经限制性酶切、DNA测序鉴定重组载体.质粒扩增提取,经脂质体介导法转染HEK293A细胞,实时定量RT-PCR、Western blot检测转染后p53RFP mRNA及蛋白的表达水平.采用CCK-8检测p53RFP表达上调对HEK293A细胞增殖的影响.结果 p53RFP转染后其mRNA及蛋白表达水平均显著上调;p53RFP转染后72 h、96 h,细胞增殖受到显著抑制(P＜0.01).结论 成功构建p53RFP表达载体pcDNA4-p53RFP,并可在HEK293A细胞内有效表达,其表达可抑制HEK293A细胞增殖.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赖文岩	南方医科大学南方医院心内科	112	677	13.0	19.0
2	吴平生	南方医科大学南方医院心内科	131	614	13.0	18.0
3	王月刚	南方医科大学南方医院心内科	48	237	8.0	12.0
4	张艺军	广州军区广州总医院干部病房二科	14	64	5.0	7.0
5	裴静娴	南方医科大学南方医院心内科	12	40	5.0	5.0