Ⅳ型登革病毒中国株LD34在KMB17细胞上的适应性及其生物学特性

• 作者: 孙强明 岳耀斐 杨丽娟 潘玥 赵玉娇 陈俊英 龙海亭
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 登革病毒 人胚肺二倍体细胞 适应性 生物学特性
• 年，卷（期）: 2012,（9）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1135-1138
• 分类号: R373.3+3|R392-33
• 语种: 中文

摘要

目的 研究Ⅳ型登革病毒中国株LD34在人胚肺二倍体细胞KMB17上的传代适应性及其生物学特性.方法 将Ⅳ型登革病毒中国株LD34在C6/36细胞上扩增,并采用微量细胞病变法测定病毒的感染性滴度.以2.0 MOI的病毒接种KMB17细胞传代培养,筛选KMB17细胞适应株,并进行培养条件的优化.将Ⅳ型登革病毒中国株LD34 KMB17细胞适应株连续传10代,测定病毒的感染性滴度,免疫荧光法检测病毒的抗原性,RT-PCR法扩增登革病毒的特异性基因.结果 筛选出的Ⅳ型登革病毒中国株LD34在KMB17细胞上的最佳培养条件为病毒接种MOI 0.4,培养基血清浓度5％;其感染KMB17细胞后可产生明显的细胞病变(CPE),连续传10代,病毒滴度达7.75 CCID50/ml;第10代病毒的抗原性呈阳性;第10代病毒能扩增出511 bp的登革病毒特异性基因和393 bp的Ⅳ型登革病毒特异性基因.结论 获得了Ⅳ型登革病毒中国株LD34 KMB17细胞适应株,病毒保持了原始毒株的基本生物学特性,且具有较好的抗原性.