二株不同基因型树鼩呼肠孤病毒的分离和鉴定

• 作者: 代解杰 刘建生 刘红旗 孙晓梅 李晓菲 李晓飞 李超 陶玉芬
• 来源期刊: 中国实验动物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 哺乳动物呼肠孤病毒 树鼩 基因型 S1基因 血清型
• 年，卷（期）: 2015,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 365-370
• 页数: 6页
• 分类号: Q95-33
• 字数: 4687字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-4847.2015.04.007

摘要

目的：从腹泻树鼩的粪便样本中分离和鉴定病毒。方法树鼩腹泻粪便样本分别接种Vero、LLC-MK2和KMB17细胞，经连续传代，观察记录细胞病变，并对培养上清进行透射电镜检查、病毒RNA-PAGE电泳分析、轮状病毒鉴别筛查、S1全长基因片段扩增和生物信息学分析。结果树鼩腹泻粪便样品在KMB17、Vero 和LLC-MK2细胞上经连续3代次传代后，均能产生细胞病变。经电镜检查、病毒RNA-PAGE电泳分析和轮状病毒鉴别筛查，推测其为呼肠孤病毒。病毒基因组全长S1基因扩增、序列测定和分析结果表明，KMB17培养上清中获得的病毒与I型原型株T1 L同源性最高，核苷酸和氨基酸同源性分别为85％和90％，因此该病毒定义为呼肠孤病毒I型。而LLC-MK2和Vero细胞上清中的病毒S1基因与III型原型株T3D核苷酸和氨基酸同源性分别为85％和92％，因此为呼肠孤病毒III型。结论对今后树鼩和其他宿主呼肠孤病毒的分离鉴定有一定的指导意义。