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摘要:
目的 探讨以SELDI蛋白质芯片筛选后的细胞差异表达蛋白的分离和鉴定方法及其意义.方法 以经体外培养及10 μmol/L褪黑素药物干预的内皮祖细胞差异表达蛋白质为研究对象,分别采用Tricine-SDS-PAGE和双向凝胶电泳方法进行差异蛋白分离及结果比较,以FT-MS二级质谱鉴定.结果 经Tricine-SDS-PAGE分离后,选取分子量为53 ku左右的趋势性差异表达蛋白进行FT-MS分析,质谱鉴定为微管蛋白-α3(吻合度评分为87).经双向凝胶电泳分离后,于凝胶近酸性端、分子质量在72 ~95 ku之间区域,选取蛋白表达量较高的一点,质谱鉴定其为人热休克蛋白90-α(吻合度评分为91).结论 Tricine-SDS-PAGE对于大致35~62 ku范围的蛋白分离较清晰、重复性好且样品用量少,2-DE对最低上样量有较严格要求,但它能提供分子质量、等电点双重参数来更准确定位所感兴趣蛋白点,且对大分子质量蛋白的分离效果更佳,经质谱鉴定结果理想.
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文献信息
篇名 SELDI蛋白质芯片筛选差异蛋白分子的二级鉴定
来源期刊 基础医学与临床 学科 生物学
关键词 SELDI Tricine-SDS-PAGE 双向凝胶电泳 质谱
年,卷(期) 2012,(3) 所属期刊栏目 研究论文
研究方向 页码范围 278-282
页数 分类号 Q819
字数 2187字 语种 中文
DOI
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 修瑞娟 49 252 10.0 13.0
2 仉红刚 中国医学科学院北京协和医学院微循环研究所卫生部微循环重点实验室 13 11 2.0 2.0
3 张秋菊 中国医学科学院北京协和医学院微循环研究所卫生部微循环重点实验室 8 9 2.0 2.0
4 卡米拉·阿不里米提 中国医学科学院北京协和医学院微循环研究所卫生部微循环重点实验室 2 3 1.0 1.0
5 马可 中国医学科学院北京协和医学院微循环研究所卫生部微循环重点实验室 2 3 1.0 1.0
6 王琴 中国医学科学院北京协和医学院微循环研究所卫生部微循环重点实验室 2 3 1.0 1.0
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Tricine-SDS-PAGE
双向凝胶电泳
质谱
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基础医学与临床
月刊
1001-6325
11-2652/R
大16开
北京东单三条5号
82-358
1981
chi
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